胎牛血清是通過從胎牛血漿中去除纖維蛋白形成的非常復雜的混合物。它含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,其大部分成分是已知的,但有些尚不清楚。這些物質在促進細胞生長或抑制生長方面達到生理平衡。
胎牛血清在細胞培養中通常優于其他類型的血清。由于胎牛從未暴露于外界,抗體含量明顯低于新生牛和小牛血清,因此抗體與培養細胞發生交叉反應的風險也較低,是理想的細胞生長補充劑。調整在細胞培養中主要起到以下作用:
1、提供維持細胞指數生長的激素、基礎培養基中缺乏或少的營養物質以及主要的低分子營養物質。
2、提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬等激素,并能與它們所結合的物質結合或調節其活性。
3、在某些情況下,結合蛋白可以與有毒金屬和熱原結合來解毒。
4、是細胞在塑料培養基質上粘附和鋪展所需的因子來源。
5、作為pH緩沖劑。
6、提供蛋白酶抑制劑,使細胞傳代過程中剩余的胰蛋白酶失活,保護細胞免受損傷。
7、參與細胞冷凍保存。
在細胞培養中,添加到基礎培養基中的胎牛血清濃度大多為5%~20%(常見的是10%)。具體到不同的實驗,最佳濃度應根據文獻報道,或細胞類型或基礎培養基的組成來確定。
胎牛血清應在-20℃保存,干冰冷鏈運輸,避免反復凍融,以保證血清中因子的活性不受影響,保證血清的優良品質。將血清從-20℃取出后,融化,按推薦體積加入基礎培養基中,充分混合,制成新鮮的*培養基。(整個操作需要在無菌超凈臺上進行,注意無菌操作。)