大鼠海馬神經元細胞取自新鮮的組織,按照標準操作流程分離培養,*培養基能提供細胞理想的生長條件,降低雜細胞污染,保證不同批次間細胞質量的穩定,所提供的原代細胞均需經過細胞類型特異性標記物、細胞形態學等檢測,保證細胞純度在90%以上;同時也需經過微生物檢測,保證不含有HIV、HBV、HCV、支原體、真菌及其他類型的細菌。
海馬椎體神經元是海馬區的主要成分,主要功能是參與近期記憶、情緒及內臟功能調節、是老年性癡呆等疾病的主要病灶之一。海馬神經元細胞培養是研究神經細胞生物學特性和外源干擾因素作用(細胞因子)的有效細胞模型,其在神經生物學,發育生物學體外實驗研究中已被廣泛應用。大鼠海馬神經元細胞采用胰酶消化制備而來,細胞總量約為5×105個/瓶,細胞純度可達80%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
收到大鼠海馬神經元細胞請按照以下方法進行操作。
1、取出細胞瓶,75%酒精消毒后拆下封口膜,放入37℃,5%CO2培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。
2、海馬神經元細胞為終末分化的細胞,建議直接使用,不建議擴大培養。
3、待細胞狀態最佳時準備轉孔培養,進行實驗:
(1)吸出細胞瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次。
(2)加入0.125%的胰蛋白酶消化液約1mL至培養瓶中,37℃消化1min左右;顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化。
(3)用吸管輕輕吹打混勻,按適當的比例進行轉孔培養實驗,放入37℃,5%CO2細胞培養箱中培養。
(4)待細胞*貼壁后,培養觀察,每隔2-3天更換新鮮的*培養基。